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線粒體染色試劑盒的應(yīng)用細(xì)節(jié)

更新時間:2017-10-23點(diǎn)擊次數(shù):1202
  線粒體染色試劑盒其主要功能是提供細(xì)胞 內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。在光學(xué)顯微鏡下線粒體呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細(xì)線。線粒體熒光探針 MitoTracker RED 硫醇 Thiol ,是一種含有 ( )氯甲基基團(tuán)的熒光染料,自由通過細(xì)胞膜,選擇性地聚集 在線粒體。它可以對活細(xì)胞進(jìn)行直接染色,在 580nm 波長可以清晰看到被染成紅色的線狀或顆粒小體的線粒體。并可以分析線粒體膜電位,以檢測線粒體活性。 產(chǎn)品內(nèi)容 清理液(Reagent A ) 毫升 固著液(Reagent B ) 毫升 預(yù)備液(Reagent C ) 毫升 染色液(Reagent D ) 微升 產(chǎn)品說明書 1 份 保存方式 保存 染色液(Reagent D )在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備。 
 
  線粒體染色試劑盒用于沉淀真菌/酵母細(xì)胞 培養(yǎng)箱:用于染色孵育 (共聚焦)熒光顯微鏡:用于細(xì)胞熒光分析 1 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)開始前,將-20 ℃冰箱里的試劑盒中的染色液(Reagent D)置入冰槽里融化,然后分別移 出xx 微升預(yù)備液(Reagent C )和 xx 微升染色液(Reagent D )到新的 1.5 毫升離 心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。 一、 活體染色 7 1. 準(zhǔn)備好 1 毫升新鮮的酵母菌液(OD600 =1 至 2 ;1 X 10 細(xì)胞/毫升) 2 . 移入到 1.5 毫升離心管 3 . 放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心 10 分鐘,速度為 1000g (或3000RPM,例如 eppendorf 5415 ) 4 . 小心抽掉上清液 5 . 加入 xx 毫升預(yù)冷的 清理液(Reagent A ),混勻 6 . 放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心 10 分鐘,速度為 1000g (或3000RPM,例如 eppendorf 5415 ) 7 . 小心抽掉上清液 8. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟 5 至 7 一次 9 . 加入 xx 升預(yù)冷的 清理液(Reagent A ),混勻 10.加入xx 微升含有 預(yù)備液(Reagent C )和染色液(Reagent D )的染 色工作液,充分混勻
 
  線粒體染色試劑盒是設(shè)計(jì)用來標(biāo)記活細(xì)胞的線粒體的,使之帶綠色熒光。本試劑盒使用一種專屬染料,選擇性地在不同膜電位的線粒體中積累。這種線粒體指示劑是一種疏水性復(fù)合物,可以輕易地滲透進(jìn)入活細(xì)胞中,且當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性線粒體指示劑可以在線粒體中保留很長時間,因?yàn)樵撝甘緞в心芏ㄎ挥诩?xì)胞的基團(tuán)。其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著性提高。本標(biāo)記方法十分穩(wěn)定,需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中,例如微孔板分析,免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)。它也可以用于多種不同類型的研究中,包括細(xì)胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性的研究。本試劑盒提供所有的必需組分和*細(xì)胞標(biāo)記方法。它適用于增殖型和非增殖型細(xì)胞,也可以用于懸浮和貼壁細(xì)胞。

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